Autores
Belén Callejón Leblic, Pilar Muñoz Zara, Tamara García Barrera, Jesús Grávalos Guzmán, Antonio Pereira Vega, Jose Luis Gómez Ariza
Introducción
El cáncer de pulmón (CP) es una patología frecuente y de alta mortalidad, fundamentalmente por su diagnóstico tardío. La metabolómica permite identificar en estadios iniciales los metabolitos cuya concentración se altera por una enfermedad, así como los cambios producidos en las distintas rutas y ciclos metabólicos. Se ha aplicado a diversos fluidos biológicos: suero, plasma, saliva, sudor, lavado broncoalveolar (LBA) y otros. Hasta la fecha no se han realizado estudios metabolómicos basados en el uso del LBA, por lo que el presente estudio innovará el conocimiento del metabolismo de este tipo de cáncer y en la búsqueda de potenciales biomarcadores (BM). OBJETIVOS: 1) Analizar y comparar los perfiles metabolómicos de pacientes con/sin CP en muestras de LBA; y 2) Identificar los metabolitos responsables de las diferencias encontradas.
Metodología
Se han analizado 24 muestras de LBA de pacientes con CP y 41 muestras de LBA de pacientes (controles) con otras enfermedades respiratorias (20 por estudio de enfermedad pulmonar intersticial difusa, 7 por estudio de hemoptisis y 14 por otras causas). Se han aplicado dos técnicas metabolómicas complementarias basadas en el uso de la espectrometría de masas de alta resolución con infusión directa (DI-ESI-QTOF-MS) y la cromatografía de gases con detector de masas (GC-MS). Para establecer BM potenciales de CP se ha aplicado análisis discriminante de mínimos cuadrados parciales (PLS-DA). La capacidad discriminante de cada metabolito se estableció mediante el cálculo del área bajo la curva ROC.
Resultados
El PLS-DA muestra una clara clasificación entre CP y controles, lo que muestra la presencia de metabolitos que causan discriminación entre ambos grupos. Se han encontrado un total de 43 metabolitos alterados en el LBA de pacientes con CP. Los niveles de ácido acético, urea, acetamida, ácido palmítico, ácido esteárico, adenina y fosfocolina se sobreexpresan en los casos de CP. Los niveles de ácido láctico, glicerol, glicina, ácido aspártico, prolina, glutamina, ácido benzoico, fructosa, ácido fosfórico, ácido isocítrico, inositol, galactosa, inosina, ácido oleico, colesterol, colina, serina, valina, piroglutamato, creatina, acetilcolina, glutamato, carnitina, arginina, acetilcarnitina, glicerofosfocolina y los fosfolípidos LPS(18:0), LPC(18:2), LPC(22:5), PE(16:0/18:0), PE(18:1/18:0), PE(18:0/18:0), PPE(18:1/20:4), PPE(18:0/20:4), PC(16:0/16:0) y PC(18:1/18:1) se inhibieron en los enfermos de CP frente a los controles. El glicerol obtuvo un área bajo la curva ROC de 0.88.
Conclusiones
1. En el análisis del LBA se encuentran perfiles metabolómicos claramente diferentes entre sujetos con/sin cáncer de pulmón 2. Se han identificado los metabolitos causantes de las diferencias encontradas. 3. El análisis de las rutas metabólicas alteradas indica que el metabolismo de los glicerofosfolípidos fue uno de los más afectados y el glicerol el metabolito que más se altera.
Parcialmente financiado por la Beca Neumosur 8/2012 y la Beca SEPAR 124/2012
