ANÁLISIS METABOLÓMICO EN MUESTRAS DE SUERO DE PACIENTES CON CÁNCER DE PULMÓN
AUTORES
A. Pereira Vega, E. Vázquez Gandullo , M. González Fernández, J.A. Maldonado Pérez, T. García Barrera, J. Grávalos Guzmán, J.L. Gómez Ariza, A.J. Ruiz Rubio
INTRODUCCIÓN
A través de un procedimiento metabolómico basado en el uso de espectrometría de masas se han detectado posibles biomarcadores (BM) que permitirían diferenciar entre pacientes con cáncer de pulmón (CP) y sujetos sanos, posibilitando un diagnóstico precoz de esta enfermedad. Asimismo se investiga la identificación de BM específicos de determinados tipos de CP.
METODOLOGÍA
A un grupo de 30 pacientes diagnosticados de CP y a 30 controles sanos se les extrajeron muestras de sangre para su posterior análisis. Se obtuvieron los metabolitos del suero mediante precipitación de proteínas y se analizaron mediante infusión directa en espectrómetro de masas de triple cuadrúpolo tiempo de vuelo (utilizando modo de ionización positiva y negativa). Esta técnica junto a sistemas de masas de alta resolución (QqQ-TOF-MS) permite el análisis de un gran número de muestras en poco tiempo, con la obtención de un gran número de metabolitos. Los perfiles metabolómicos obtenidos para ambos fueron comparados estadísticamente mediante análisis discriminante de mínimos cuadrados parciales (PLS-DA), con el fin de encontrar los metabolitos alterados a causa de la enfermedad, y emplearlos como potenciales BM. Aplicamos igualmente la metodología descrita para obtener perfiles metabólicos de los distintos tipos de CP.
RESULTADOS
El registro de la espectrometría de masas muestra una clara discriminación metabolómica entre los casos de CP y controles sanos. Se han observado distintos metabolitos sobreexpresados en pacientes con CP, tales como la carnitina y sus derivados (butiril-carnitina y oleil-carnitina) que reflejan alteraciones en el metabolismo energético celular, y la fenilalanina y dopamina, relacionados con la regulación de la función inmune. Se observó también una disminución de los niveles de fosfolípidos (derivados de colina e inositol), probablemente como consecuencia de alteraciones lipídicas de las membranas celulares, y de las lisofosfatidilcolinas, involucradas en la regulación de la proliferación celular e invasión de células cancerígenas. El registro de la espectrometría según los distintos tipos de CP (epidermoide, células grandes, adenocarcinoma y células pequeñas) también permitió una clara diferenciación entre ellos.
CONCLUSIONES
1.Los grupos de estudio (CP y controles sanos) presentan perfiles metabolómicos diferentes, que permiten su discriminación estadística. Se han identificado los metabolitos que causan esta discriminación y se han relacionado con rutas previamente asociadas a procesos neoplásicos. 2.Los distintos tipos de CP también presentan perfiles metabolómicos diferentes entre sí y permiten su diferenciación estadística. Estos resultados preliminares son muy alentadores, una vez confirmados en mayor número de casos, para la obtención de BM específicos para los distintos tipos de CP. 3.Los resultados obtenidos sugieren la utilidad del empleo de esta técnica en muestras de suero, ya que permiten investigar distintas rutas bioquímicas y así ampliar el número de potenciales BM de CP.
